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离子排阻色谱柱可以反冲吗?
发布时间:2017-03-22   点击次数:997次


    离子排色谱柱上基本都有“-->”标志,表示流动相的流动方向,有的在色谱柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字样,翻译成“决不能反冲”的意思,色谱柱可以反冲吗、色谱柱能不能反冲的问题争议很大,但在我们工作中,用色谱柱反冲技术修复色谱柱收到柱效提高、柱效恢复的效果。

    离子排色谱柱使用一段时间后柱效下降,此时可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填满,然后用流动相反冲一下,可使柱效恢复,因反冲可以改善柱头死空间。
因反冲可把沉积在过渡板上的细微颗粒冲走,有时也可用反冲技术使柱压降低。
 
一些反冲离子排斥色谱柱的方法:
一、如果是已经保存好的色谱柱:
       1、反向接柱,先用 95 水:5 乙腈, 0.2 ml/min流速,冲 20 倍柱体积;
        2、然后用四氢呋喃,0.2 ml/min流速,冲 20 倍柱体积;
        3、最后用 95 乙腈:5 水,0.2 ml/min,冲 20 倍柱体积;
        4、正向接柱,用 65%乙腈水保存色谱柱。
二、如果是刚走完样的色谱柱,那么请按照下列步骤进行:
        1、卸掉保护柱
         2、正向接柱,常规方法冲洗色谱柱(先 95水,后 95 乙腈或甲醇);
         3、反向接柱,先用 95 水:5 乙腈 0.2 ml/min,冲 20 倍柱体积;
         4、然后用四氢呋喃,0.2 ml/min,冲 20 倍柱体积;
         5、最后用 95 乙腈:5 水,0.2ml/min,冲 20 倍柱体积;
         6、正向接柱,用 65%乙腈水保存色谱柱。
 
注意:
        1、20 倍柱体积:250*4.6mm色谱柱约 80ml 流动相,150*4.6mm色谱柱 约 48ml流动相。
        2、反向接柱时不要接检测器!

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